細菌總數(shù)是指1mL水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，經(jīng)37℃、24h培養(yǎng)后所生長的菌落數(shù)。計量單位一般是每mL水中所含有的總菌數(shù)。水中的細菌總數(shù)往往同水體受到有機物污染的程度有關，是評價水質(zhì)污染程度和對人體可能造成傷害的重要指標之一。
細菌總數(shù)的分析方法采用標準平皿法對水樣中的細菌記數(shù)，這是一種測定水中好氧和兼性厭氧的異養(yǎng)菌密度的方法。但由于沒有任何一種營養(yǎng)基或任一環(huán)境條件能滿足一個水樣中所有細菌的生理要求，而且水中細菌能以單獨個體、成對、鏈狀、成簇或成團的形式存在，所以測得的菌落數(shù)實際上要低于被測水樣中真正存活的細菌數(shù)目。
用無菌操作法吸取1mL水樣或2～3個適宜稀釋倍數(shù)的稀釋水樣，注入滅菌平皿中，再傾注15mL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基并與水樣充分混勻，每個水樣做兩個平行樣，另外每次檢驗還要做只傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的空白對照。
培養(yǎng)之后，應立即進行平皿菌落計數(shù)。如果計數(shù)必須暫緩進行，可將平皿存放于5～10℃的環(huán)境下，但不能超過24h，而且也不可以將這種做法當作常規(guī)的操作方式。
對平皿菌落計數(shù)時，可用肉眼觀察，為防止遺漏，必要時應用放大鏡檢查。對那些看來相似、距離相近但并不相觸的菌落，只要其距離小于最小菌落的直徑，就應當分別予以計數(shù)。對那些緊密接觸但外觀(形態(tài)或顏色)有差異的菌落也要分別予以計數(shù)。
在求同一稀釋度的平均菌落數(shù)時，如果其中一個平皿有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的菌落數(shù)。如果片狀菌落不到平皿的一半、而其余部分菌落的分布又很均勻時，則可以將生長均勻的1/2平皿菌落計數(shù)后乘以2代表全皿菌落數(shù)。
細菌總數(shù)的測定結果是以每個平皿菌落總數(shù)或同一稀釋度平行實驗平皿的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。當最終結果在100以內(nèi)時按實際菌落數(shù)記錄結果;大于100時，采用兩位有效數(shù)字，用10的指數(shù)來表示，如果菌落數(shù)無法計數(shù)，在報告結果時要注明稀釋倍數(shù)。
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